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第一章 细胞因子及其ELIS
第二章 细胞凋亡和细胞增殖
第三章 细胞生物学研究
第四章 研究专题
第五章 信号转导和药物开发
第六章 免疫学制品
第七章 PCR & RT-P
第八章 分子克隆
第九章 核酸纯化和分子量Ma
第十章 转 染
第十一章 核酸标记及检测
第十二章 蛋白质研究
附录一 常用实验方法
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热休克蛋白和分子伴侣

热休克蛋白和分子伴侣

    热休克蛋白(Heat shock proteins, Hsp)是广泛表达的多肽,其表达对应于多种不同的代谢刺激而增加。虽然命名如此,但大多数热休克蛋白是组成性表达并执行基本的功能。最引人注意的是它们的分子伴侣作用,在整个细胞中促进蛋白质的合成和折叠。此外,有研究显示热休克蛋白参与蛋白质装配、分泌、运输、蛋白质降解以及对转录因子及蛋白激酶的调控。应激后热休克蛋白水平增加在细胞的稳定性中起着重要作用。

Assay Designs致力于向科学家们提供可靠的用于科学发现的工具。其于2005年与Stressgen Bioreagents的合并拓宽了其产品线,增加了Stressgen超过15年研究生产的高质量的热休克蛋白相关产品,包括ELISA试剂盒、抗体、重组蛋白及试剂,并将继续在这一领域开发制造更多优质产品。

Hsp10

Hsp27

Hsp32

Hsp40DnaJ家族

Hsp60GroEL伴侣素

Hsp70DnaK

Hsp90

Hsp110

伴侣蛋白及其他

 欲查询更多产品信息请登陆Assay Designs网站http://www.assaydesigns.com/

Hsp10

Hsp10,又称伴侣素10Cpn10),是哺乳动物对应于细菌GroES基因产物的~10kDa同等物。Hsp10以寡聚体在体内存在并与Hsp60相互作用,后者是细菌GroEL蛋白的哺乳动物同系物。Hsp10/Hsp60伴侣素一起存在于线粒体中促进新合成蛋白质的折叠并可能参与受应激损伤的蛋白质的重新折叠。在植物中,一个类似的伴侣素系统在叶绿体中运作,称为Rubisco结合蛋白。最后,在细菌中GroELGroES参与很多蛋白质的折叠和装配。

Assay Designs Products

目录号

产品说明

种属特异性

用途

SPA-110

Hsp10 (Cpn10) Polyclonal Antibody

H, M, R, X

WB, IP

SPA-210

GroES Polyclonal Antibody

E.coli

WB, IP

SPP-620

GroES Recombinant Protein

E.coli

 


Hsp27

     Hsp27(有时亦称Hsp20, Hsp25, Hsp28或低分子量热休克蛋白)是a晶状体蛋白质的同系物。这两个家族的蛋白质均以其寡聚体结构为特征并被认为具有不依赖ATP的伴侣蛋白功能。Hsp27结构/功能受不同蛋白激酶介导的磷酸化作用的调节。除了其伴侣蛋白功能,有研究显示Hsp27aB晶状体蛋白还介导结构完整性和膜稳定性,影响肌动蛋白聚合,干预纤丝组构、细胞凋亡和侵入潜能。有证据提示小热休克蛋白表达的改变牵涉人类疾病包括癌症、白内障、神经变性机能紊乱和心血管疾病的发病机制。

Assay Designs Products

Hsp32(血红素加氧酶)

   血红素加氧酶或Hsp32是亚铁血红素分解代谢中的主要成分,催化亚铁血红素向胆红素降解的第一步。血红素加氧酶至少包括3个亚型:应激诱导的HO-1和组成性表达的HO-2HO-3HO-1的诱导因素包括热休克,氧化应激,巯基反应试剂,重金属,炎症介质和某些生长因子。该蛋白质大多数位于内质网,但亦可存在于胞质膜和线粒体。血红素加氧酶生成的产物具有重要的生理学效应:一氧化碳是有效的血管舒张剂;胆绿素及其产物胆红素是抗氧化剂;释放的铁如果不被有效再利用则能增进氧化应激。对HO表达的调节可能有助于保护机体抵抗动脉粥样硬化症,氧化应激,冠状局部缺血,高血压和某些神经变性疾病。

Assay Designs Products

Hsp40DnaJ家族

存在于胞质溶胶的哺乳动物Hsp40是众多与DnaJ蛋白密切相关的家族成员之一,后者首次描述于大肠杆菌。Hsp40/DnaJ家族成员与Hsp70/DnaK蛋白协作,促进ATPADP的水解,从而帮助Hsp70伴侣蛋白锁定其所结合的蛋白质底物。因此,真核生物Hsp70家族的每个不同成员需要一个特定的DnaJ同系物以发挥它们的伴侣活性。在酵母中已鉴定出20多个编码DnaJ相关蛋白的基因。在动物细胞,Hsp40家族蛋白表现出广泛的组织分布,各成员存在于大多数细胞内腔室中。Assay Designs现提供纯化的DnaJHsp40蛋白,并有许多针对各个蛋白的抗体。在不远的将来还将有针对DnaJ/Hsp40家族其它成员的新产品上市。

 

Assay Designs Products

目录号

产品说明

种属特异性

用途

SPA-400

Hsp40 Polyclonal Antibody

H, M, R, C, X

WB, IP, ICC, IHC

SPA-450

Hsp40 Monoclonal Antibody (2E1)

H, M, R

WB, IP

SPA-410

DnaJ Polyclonal Antibody

E. coli

WB, IP

SPP-400

Hsp40 Recombinant Protein

H

 

SPP-640

Active DnaJ Recombinant Protein

E. coli

 

 

Hsp60GroEL伴侣素

热休克蛋白Hsp60(真核生物)和GroEL(细菌)家族的成员是一些被研究得最充分的分子伴侣。细菌GroEL,因其在噬菌体生长中的重要作用而命名,以大的同寡聚体复合体的形式存在,识别和结合未折叠的多肽。通过与其特定的辅助因子(真核生物中为Hsp10,细菌中为GroES, )组合,Hsp60/GroEL蛋白与新合成的多肽结合,并经一轮或多轮ATP水解作用促进其折叠成天然状态。哺乳动物Hsp60定位于线粒体内,而一个相关的名为Rubisco结合蛋白的蛋白质则在植物叶绿体内运作。最后,在真核生物胞质溶胶内,名为CCTTRIC的相关蛋白形成异寡聚体结构,并显示类似的有选择地结合蛋白质底物并促进其折叠和/或更高级别的装配。通常GroEL/ESHsp60/Hsp10蛋白质折叠机器也被称为伴侣素。有研究显示,体外及体内伴侣素,或者单独或者与其他伴侣蛋白和ATP一起,协调特定变性蛋白质的重新折叠。除了作为分子伴侣的突出作用,GroELHsp60家族的成员长期以来也被认为是高免疫原性蛋白并因而吸引了免疫学家们的许多注意力。Assay Designs提供一大批由不同来源分离出的纯化伴侣素蛋白以及能够区分不同家族成员的抗体。

Assay Designs Products

目录号

产品说明

种属特异性

用途

EKS-600

Hsp60 ELISA Kit (measures protein)

H

 

EKS-650

Hsp60 ELISA Kit (measures antibodies)

H

 

SPA-807

Hsp60 Monoclonal Antibody (LK-2)

H, M, R, C, Y

WB, IHC, F

SPA-806

Hsp60 Monoclonal Antibody (LK-1)

H, M, R, C, X

WB, IP, F

SPA-829

Hsp60 Monoclonal Antibody (11-13)

H, M, R, D

WB, IP, IHC, F

SPA-828

Hsp60 Goat Polyclonal Antibody

H, M, R, C, X

WB, IP

SPA-881

Hsp65 Monoclonal Antibody (3F7)

H, M, R, D

WB

SPS-870

GroEL Monoclonal Antibody (9A1/2)

E. coli

WB, IP

SPS-875

GroEL Polyclonal Antibody

H, M, R, Y, E. coli

WB

SPA-110

Hsp10 (Cpn10) Polyclonal Antibody

H,,M, R, X

W, IP

SPA-210

GroES Polyclonal Antibody

E. coli

W, IP

CTA-123

TCP-1a Monoclonal Antibody (23c)

M, R

W, IP, ICC

CTA-191

TCP-1a Monoclonal Antibody (91a)

H, M, R, D, Y

WB, IP, F

CTA-202

TCP-1a Monoclonal Antibody

H, M, R, C

WB

ESP-540

Active Hsp60 Recombinant Protein (Low Endotoxin)

H

 

NSP-540

Active Human Hsp60 Recombinant Protein

H

 

ESP-741

Active Mouse Hsp60 Recombinant Protein (Low Endotoxin)

M

 

SPP-741

Hsp60 Recombinant Protein

M

 

SPP-742

Hsp60 Recombinant Protein

R

 

NSP-581

Hsp65 Recombinant Protein

Mycobacterim

 

SPP-610

Active GroEL Recombinant Protein

E. coli

 

SPP-620

GroES Recombinant Protein

E. coli

 

Hsp70DnaK

 

热休克蛋白的Hsp70家族包括众多同系物,分子量大小从66kDa78kDa。这些蛋白质包括见于细胞内大部分腔室的同族成员以及高度可诱导的主要分布于细胞质或细胞核的亚型。所有Hsp70家族成员含有一个高度保守的N末端ATP酶结构域,以及一个保守的疏水的肽结合结构域(PBD)和更为多变的a螺旋结构域。Hsp70的激活受N末端ATP结合的协调,后者引起构象变化而将帽打开,允许PBD与多种多样的客户蛋白在未折叠、错误折叠或变性状态下相互作用。Hsp70 ATP酶活性受缔合何种特定辅助伴侣蛋白分子的的影响,后者包括Hsp40, Hip, Hop, Hup, HapCHIP。这些辅助伴侣蛋白与Hsp70合作折叠新合成的蛋白质、重新折叠错误折叠的或变性的蛋白质、协调蛋白质的跨细胞膜运输、拆卸笼形蛋白包裹的小泡、抑制蛋白质聚集体以及瞄准经蛋白酶体途径的蛋白质降解。Hsp70水平的升高与细胞凋亡的抑制相关联,而Hsp70的表达与细胞弱分化、淋巴结转移灶增加、药物抗性以及不佳的临床结果之间的临床相关性则表明Hsp70可能在诊断、预后和治疗人类恶性肿瘤中有功用。

 Hsp90

90kDa分子伴侣家族由数种蛋白质组成,包括90kDa热休克蛋白Hsp9094kDa葡萄糖调节蛋白grp94,它们是胞质溶胶和内质网的主要分子伴侣蛋白。在哺乳动物细胞至少有两种Hsp90亚型,Hsp90aHsp90b,它们各由不同基因编码。所有已知的Hsp90 蛋白家族成员都是高度保守的,尤其在N末端和C末端区,其间有具有不同客户蛋白特异性的独立的伴侣蛋白位点。Hsp90是细胞伴侣蛋白网络的一部分,后者调节蛋白质折叠和装配,需要ATP和辅助伴侣蛋白(如Hsp70, Hsp40, Hip/Hop, p23Aha1)来发挥功能。对Hsp90蛋白质折叠机器的抑制针对客户蛋白,后者经历泛素介导的蛋白质水解作用。Hsp90还通过其对客户蛋白如ErbB2/Her-2, Akt, Raf, CDK1CDK4的结合而成为基础细胞过程如激素信号传导、细胞生长和分化的一个必要成分。除了其在蛋白质折叠中自稳定和应激诱导的作用,grp94还能在把肽从细胞外间隙经细胞内运输到抗原呈递细胞的MHC I类抗原处理途径中发挥功能。寻求打断Hsp90活化关键存活途径的策略有望直接或佐剂治疗Hsp90表达改变的癌症。

 Hsp110

      Hsp110属于一个被称为Hsp110/SSE(酵母应激七十)家族的应激大蛋白质家族。哺乳动物Hsp110与其远亲Hsp70分享将近30%的氨基酸一致性,主要是在保守的ATP结合结构域。Hsp110是哺乳动物组织中34个最丰富的Hsps之一,在脑的组成性表达最高。在功能上,Hsp110表现为与其他伴侣蛋白(主要是Hsp70Hsp25)组成复合体以维持和修复蛋白质折叠。Hsp110在抗热性上比Hsp70更有效,并被显示通过N末端ATP结合结构域而具有RNA结合属性。由于其在与肽结合中的固有效率,Hsp110被广泛用作免疫佐剂来向抗原呈递细胞传递已知肿瘤抗原,从而产生抗原特异的天然和适应性抗肿瘤应答。

Assay Designs Products

目录号

产品说明

种属特异性

用途

SPA-1101

Hsp110 Polyclonal Antibody

H, M, R, B, Y

WB, IP

SPA-1103

Hsp110 Polyclonal Antibody

H, M, R, B, X

WB

 

伴侣蛋白及其他

       蛋白质折叠的自稳定过程和蛋白质折叠机器在应激诱导条件(即热、饥饿、氧化)下的保护功能依赖于热休克蛋白以及一组多样的辅助伴侣蛋白和转录调节因子。这些分子包括Hsp70辅助伴侣蛋白HIPHOP,定位于ER的伴侣蛋白CalnexinCalreticulin,以及蛋白质二硫异构酶(PDI)。定位于ER的伴侣蛋白在ER折叠,并通过其KDEL肽基序而维持,后者与KDEL受体(Erd2p)结合。与Hsps一起,这些分子参与糖蛋白的适当折叠、阻止初生蛋白的未成熟寡聚体化、调节Hsp辅助伴侣蛋白底物特异性以及促进分泌途径中二硫键的重排。

 Assay Designs Products

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